华西口腔医学杂志 ›› 2015, Vol. 33 ›› Issue (6): 613-616.doi: 10.7518/hxkq.2015.06.013
申道南,成伟,贾岳,赵蕾,吴亚菲
Shen Daonan, Cheng Wei, Jia Yue, Zhao Lei, Wu Yafei
摘要: 目的 从基因和蛋白水平研究谷氧还蛋白(Grx)在牙龈卟啉单胞菌脂多糖(LPS)诱导脐静脉内皮细胞(EA-hy926细胞)时的表达变化及其对Akt通路的调控作用。方法 采用牙龈卟啉单胞菌的LPS(1 000 ng·mL-1)对EA-hy926细胞进行不同时间段(4、12、18、24 h)的刺激诱导,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测细胞grx1基因的表达变化;然后加入Grx特异性抑制剂氯化亚硝脲(BCNU),使用Western blot法检测对照组、LPS组(1 000 ng·mL-1LPS刺激12 h)和BCNU组(25 μmol·mL-1BCNU预处理30 min+1 000 ng·mL-1LPS刺激12 h)的Grx、Akt、磷酸化Akt蛋白的表达情况。结果 LPS诱导下,EA-hy926细胞的grx1基因表达量在各个时间段均上调,12 h时grx1表达量最高。LPS诱导12 h时,LPS组的Grx蛋白表达量较对照组明显升高(P<0.05),而BCNU可有效抑制Grx蛋白的表达(P<0.05);Akt蛋白表达量在各组间无明显差异(P>0.05),而LPS组的磷酸化Akt活性升高,显著高于对照组和BCNU组(P<0.05),与Grx蛋白的表达趋势一致。结论 LPS可以从基因和蛋白水平诱导Grx的表达;Grx是Akt的潜在调节因子,可能对LPS刺激下Akt的调控具有重要意义。
中图分类号: