变异链球菌蛋白质提取方法研究

华西口腔医学杂志

变异链球菌蛋白质提取方法研究

何永红1 田晓蓓1 万呼春2 温艳丽2 张菲菲2 马琴睿2

1.口腔疾病研究国家重点实验室，四川大学； 2.四川大学华西口腔医院综合治疗科，四川成都610041

收稿日期:2009-02-25 修回日期:2009-02-25 出版日期:2009-02-20 发布日期:2009-02-20
通讯作者: 万呼春，Tel：028-61153339
作者简介:何永红（1966-），女，四川人，副教授，博士
基金资助:
高等学校博士学科点专项科研基金资助项目（20040610081）

Study on protein extraction methods for Streptococcus mutans

HE Yong-hong1, TIAN Xiao-bei1, WAN Huchun2, WEN Yan-li2, ZHANG Fei-fei2, MA Qin-rui2

1. State Key Laboratory of Oral Diseases, Sichuan University, Chengdu 610041, China; 2. Dept. of General Treatment, West China College of Stomatology, Sichuan University, Chengdu 610041, China

Received:2009-02-25 Revised:2009-02-25 Online:2009-02-20 Published:2009-02-20
Contact: WAN Huchun，Tel：028-61153339

摘要/Abstract

摘要：

目的建立稳定、有效的提取变异链球菌蛋白质方法。方法以裂解液为提取介质，分别采用反复冻融超声、超声、热裂解和热裂解超声4种方法提取细菌蛋白质，通过分析细菌破碎程度、蛋白质SDS-PAGE电泳及蛋白质质量浓度，比较各提取方法的效果。结果除热裂解法外，其他3种方法均可有效裂解细菌，其中超声起主要作用，同时这3种方法提取蛋白质的SDS-PAGE条带分布基本相同，但反复冻融超声法提取蛋白质条带丰度最高。蛋白质质量浓度测定显示，反复冻融超声法提取蛋白质质量浓度最高。4种方法均具有较好的稳定性和重复性。结论反复冻融超声法可以有效提取变异链球菌蛋白质，有较好的稳定性和重复性，且操作简单。

关键词: 变异链球菌, 蛋白质组, 超声

Abstract:

Objective To establish an efficient and stable method for protein extraction of Streptococcus mutans. Methods The collected bacteria were treated by freeze-thaw and ultrasonic（method 1）, ultrasonic（method 2）, boiling （method 3）, boiling and ultrasonic（method 4）, respectively. The index such as state of bacteria broken, concentration of extracted protein and SDS-PAGE of protein were employed to evaluate the effects of above four methods. Results Beside the method 3, the other three methods could break the bacteria effectively, of which ultrasonic was the key factor. The pattern of SDS-PAGE which treated by method 1, method 2 and method 4 was almost same, but method 1 resulted in the best abundance. There was significantly difference among the four protein concentration extracted by four methods（P<0.05）. All methods exhibited good stability and reproducibility. Conclusion Method of freeze-thaw and ultrasonic resulted in an efficient proteins extraction of Streptococcus mutans which demonstrated good stability and reproducibility and easy to handle.

Key words: Streptococcus mutans, proteomics, ultrasonic

何永红田晓蓓万呼春温艳丽张菲菲马琴睿. 变异链球菌蛋白质提取方法研究[J]. 华西口腔医学杂志.

HE Yong-hong1, TIAN Xiao-bei1, WAN Huchun2, WEN Yan-li2, ZHANG Fei-fei2, MA Qin-rui2. Study on protein extraction methods for Streptococcus mutans[J]. West China Journal of Stomatology.

[1]	温超颖, 左雯鑫, 罗文, 何飞. 3种辅助冲洗方法对离体牙弯曲根管内壁的清洁效果[J]. 华西口腔医学杂志, 2023, 41(5): 554-562.
[2]	丛鑫禹, 薛明. 3种动能冲洗技术对管间峡区内碎屑的清理作用[J]. 华西口腔医学杂志, 2022, 40(5): 554-559.
[3]	廖盛楠, 吕炜桐, 唐权, 马玗玟, 刘力嘉, 王亮, 彭显. 选择性雌激素受体调节剂抑制变异链球菌的作用探究[J]. 华西口腔医学杂志, 2022, 40(2): 218-224.
[4]	李修珍, 姜明, 张颖, 刘育含, 李帆, 曾飞, 马玉莹, 杨加震, 杨芳. 基于重水拉曼技术的白色念珠菌对变异链球菌代谢活性和耐药性影响的研究[J]. 华西口腔医学杂志, 2022, 40(2): 225-231.
[5]	李欣蔚, 王雨霏, 姜文韬, 张凌琳. 抗菌肽GH12对龋相关三菌种生物膜形貌及菌种构成的影响[J]. 华西口腔医学杂志, 2021, 39(2): 188-194.
[6]	姜懿轩, 宫苹, 张亮. 低强度脉冲超声促进骨组织再生相关机制的研究进展[J]. 华西口腔医学杂志, 2020, 38(5): 571-575.
[7]	辛悦,杨健,宋矿余. XP-endo Finisher锉对根管内壁玷污层清除效果的体外研究[J]. 华西口腔医学杂志, 2019, 37(1): 48-52.
[8]	宋颖, 周京琳, 何远丽, 李伟, 邹玲. sortase A与变异链球菌致龋性关系的代谢组学研究[J]. 华西口腔医学杂志, 2018, 36(4): 360-366.
[9]	陈婧, 程磊, 周学东, 彭显. 龋病微生物因素研究进展[J]. 华西口腔医学杂志, 2018, 36(1): 104-108.
[10]	陈璇, 刘海霞, 彭显, 邹玲. 利用框内缺失法构建变异链球菌srtA基因缺失株[J]. 华西口腔医学杂志, 2017, 35(6): 588-592.
[11]	吴连俊, 王慧明. 术前血管定位技术在穿支皮瓣中的应用进展[J]. 华西口腔医学杂志, 2017, 35(6): 659-662.
[12]	杨丽丽, 张岩, 赵世俊, 张帅, 王娜, 徐杰, 胡姝娥, 徐志媛. 锥形束CT结合显微超声技术在下颌第一磨牙近中三根管治疗中的应用研究[J]. 华西口腔医学杂志, 2017, 35(4): 384-388.
[13]	康迪, 李雨庆, 周学东. 变异链球菌低pH感应系统的构建[J]. 华西口腔医学杂志, 2017, 35(3): 239-244.
[14]	李圆红,李忠成,罗梦奇,申道南,张舒,孟姝. Nd: YAG激光对牙根面结构及变异链球菌黏附的影响[J]. 华西口腔医学杂志, 2016, 34(6): 579-583.
[15]	李蓝,张博文,李继遥. 变异链球菌毒力相关转录调节因子的研究进展[J]. 华西口腔医学杂志, 2016, 34(6): 643-646.