口腔链球菌丙酮酸氧化酶基因缺陷型变异株的构建

华西口腔医学杂志

口腔链球菌丙酮酸氧化酶基因缺陷型变异株的构建

庞若愚　张蓉　章锦才　张蕴惠　俞少杰

610041 　四川大学华西口腔医学院(庞若愚,张蓉,张蕴惠,俞少杰) ,广东省口腔医院(章锦才),610041

收稿日期:2002-02-25 修回日期:2002-02-25 出版日期:2002-02-20 发布日期:2002-02-20
基金资助:
本课题为国家自然科学基金资助项目(编号39970793)

Construction of the Pyruvate Oxidase Gene Def iciency Variant Strain of Streptococcus oralis

Pang Ruoyu , Zhang Rong , Zhang Yunhui ,et al

Pang Ruoyu , Zhang Rong , Zhang Yunhui ,et al College of Stomatology , West China University of Medical Sciences;Zhang Jincai The Guangdong Province Hospital of Stomatology

Received:2002-02-25 Revised:2002-02-25 Online:2002-02-20 Published:2002-02-20

摘要/Abstract

摘要：

　目的:利用口腔链球菌丙酮酸氧化酶基因(sopox) 的克隆序列,重组构建新的不能产生H2O2 的口腔链球菌变异株。方法:口腔链球菌株ATCC10557 经培养后用酚—氯仿法抽提细菌染色体基因组DNA ,经PCR 扩增sopox 基因,用BamHI 进行限制酶切;参照Chris 方法进行电转化,挑选阳性菌落测定其上清液中H2O2 的含量;将细菌传3～4 代后再次重复上述检测。结果:转化子经筛选后得到1 株阳性菌落,测定上清液中H2O2 含量,第1 次检测表明变异株产生H2O2 的量仅有所下降(介于阳性对照ATCC 10557 和阴性对照大肠杆菌JM109 之间) ,经3～4 次传代后变异株中上清液H2O2 量已经明显低于阴性对照。结论:成功构建了口腔链球菌丙酮酸氧化酶基因缺陷型变异株。

关键词: 口腔链球菌, 丙酮酸氧化酶, 同源重组, 过氧化氢, 变异

Abstract:

The purpose of this study is to construct a pyruvate oxidase gene deficiency variant strain of Streptococcus oralis ( S . oralis) . Methods : The sopox gene , which was got using polymerase chain reaction (PCR) , and the 130- basepair segment of which was cut down with endonuclease BamHI , and transferred into S . oralis (ATCC10557) by using electrotransformation. The authors obtained a variant strain of S . oralis , and then the catalase activity of the first culture and 3-4 subcultures was examined. Results : The authors obtained a pyruvate oxidase gene deficiency variant strain of S . orlis. The catalase activity examination showed that the ability of producing H2O2 of the variant strain of S . orlis declined , whose catalase activity was between those of the positive control (ATCC10557) and the negative control ( Escherichia coli , JM109) . But the produced H2O2 quantity of their subcultures was less than that of the negative control.Conclusion :The construction of the pyruvate oxidase gene deficiency variant strain of Streptococcus oralis is successful.

Key words: Streptococcus oralis, pyruvate oxidase, homologous recombination, variation

庞若愚　张蓉　章锦才　张蕴惠　俞少杰. 口腔链球菌丙酮酸氧化酶基因缺陷型变异株的构建[J]. 华西口腔医学杂志.

Pang Ruoyu,Zhang Rong,Zhang Yunhui,et al. Construction of the Pyruvate Oxidase Gene Def iciency Variant Strain of Streptococcus oralis[J]. West China Journal of Stomatology.

[1]	廖盛楠, 吕炜桐, 唐权, 马玗玟, 刘力嘉, 王亮, 彭显. 选择性雌激素受体调节剂抑制变异链球菌的作用探究[J]. 华西口腔医学杂志, 2022, 40(2): 218-224.
[2]	李修珍, 姜明, 张颖, 刘育含, 李帆, 曾飞, 马玉莹, 杨加震, 杨芳. 基于重水拉曼技术的白色念珠菌对变异链球菌代谢活性和耐药性影响的研究[J]. 华西口腔医学杂志, 2022, 40(2): 225-231.
[3]	李欣蔚, 王雨霏, 姜文韬, 张凌琳. 抗菌肽GH12对龋相关三菌种生物膜形貌及菌种构成的影响[J]. 华西口腔医学杂志, 2021, 39(2): 188-194.
[4]	宋颖, 周京琳, 何远丽, 李伟, 邹玲. sortase A与变异链球菌致龋性关系的代谢组学研究[J]. 华西口腔医学杂志, 2018, 36(4): 360-366.
[5]	陈婧, 程磊, 周学东, 彭显. 龋病微生物因素研究进展[J]. 华西口腔医学杂志, 2018, 36(1): 104-108.
[6]	陈璇, 刘海霞, 彭显, 邹玲. 利用框内缺失法构建变异链球菌srtA基因缺失株[J]. 华西口腔医学杂志, 2017, 35(6): 588-592.
[7]	康迪, 李雨庆, 周学东. 变异链球菌低pH感应系统的构建[J]. 华西口腔医学杂志, 2017, 35(3): 239-244.
[8]	章可可, 周学东, 徐欣. 口腔中过氧化氢的来源及在微生态平衡中的作用[J]. 华西口腔医学杂志, 2017, 35(2): 215-220.
[9]	李圆红,李忠成,罗梦奇,申道南,张舒,孟姝. Nd: YAG激光对牙根面结构及变异链球菌黏附的影响[J]. 华西口腔医学杂志, 2016, 34(6): 579-583.
[10]	李蓝,张博文,李继遥. 变异链球菌毒力相关转录调节因子的研究进展[J]. 华西口腔医学杂志, 2016, 34(6): 643-646.
[11]	郑赛男蒋丽张雷郝丽英叶露李伟. 牙体充填材料表面粗糙度对常见口腔链球菌黏附力的影响[J]. 华西口腔医学杂志, 2016, 34(5): 448-453.
[12]	车春晓,姜科宇,马媛媛,曾飒,周建业,李志强,何祥一. 针对变异链球菌的人源特异性靶向抗菌肽C16LL-37的生物学特性[J]. 华西口腔医学杂志, 2016, 34(3): 295-301.
[13]	吴昕彧,陈晓丹,赵望泓,侯晋,陈璇. 变异链球菌磷酸转移酶系统ptxA、ptxB基因对细菌生长能力的影响[J]. 华西口腔医学杂志, 2016, 34(3): 302-306.
[14]	陈泽文黎静李恺得邱传彬谯跃银薛晶李雨庆. 不同pH值对变异链球菌ffh基因表达的影响[J]. 华西口腔医学杂志, 2016, 34(1): 23-26.
[15]	陈晓丹展秀荣吴昕彧赵春燕赵望泓. 变异链球菌SMU.2055蛋白晶体结构及其小分子抑制剂设计与筛选[J]. 华西口腔医学杂志, 2015, 33(2): 182-186.