平依林 娄锋 杨肖 张平
Ping Yilin, Lou Feng, Yang Xiao, Zhang Ping.
摘要：
目的 探究体外培养条件下Notch1蛋白高表达对细胞核因子κB受体活化因子配体（RANKL）和巨噬细胞集落刺激因子（MCSF）诱导的骨髓源破骨细胞增殖分化的影响。方法 体外培养Rosa-notch1转基因小鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs），采用RANKL和MCSF刺激BMSCs向破骨细胞方向分化。培养至第3天，实验组和对照组分别转染携带Cre重组酶和绿色荧光蛋白（GFP）的重组腺病毒（Ad-Cre-GFP）和携带GFP的重组腺病毒（Ad-GFP），启动实验组Notch1高表达，采用实时聚合酶链反应（RT-PCR）检测Notch信号通路成分（Notch1、Notch2、Notch3、Notch4、Delta1、Delta3、Delta4、Jagged1）、靶基因（Hes1）mRNA表达量以及抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）在诱导后mRNA的表达量。采用TRAP染色法观察破骨细胞增殖分化情况。结果 TRAP染色显示实验组破骨细胞形成数量明显少于对照组（P<0.05）。与对照组相比，实验组Notch1、Notch3、Jagged1、Delta3、Hes1 mRNA表达量明显增高（P<0.05），TRAP的mRNA表达量明显降低（P<0.05）。结论 Notch1高表达抑制RANKL和MCSF诱导的破骨细胞增殖分化。
