刘超1 苗雷英2 孙新华1 刘金钟3
LIU Chao1, MIAO Lei -ying2, SUN Xin -hua1, LIU Jin -zhong3
摘要:
目的探讨5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记大鼠外周血血管内皮祖细胞(EPCs)的最佳标记时间与剂量。方法建立实验性牙移动大鼠模型,密度梯度离心分离大鼠外周血EPCs并体外培养;免疫细胞化学、荧光化学鉴定细胞表面抗原;终浓度分别为5、10、15 μmol/L的BrdU标记EPCs,并于标记后12、24、48、72、96 h检测各组BrdU的标记率,筛选BrdU的最佳标记计量和时间。结果所培养细胞CD34、CD133呈阳性表达,且DiI-ac-LDL、FITC-UEA-1呈双荧光阳性;终浓度为10 μmol/L的BrdU标记细胞72 h后标记率达(66.8±2.9)%,与5 μmol/L组相比差异有统计学意义(P<0.05),与15 μmol/L组相比无统计学意义(P>0.05)。各浓度BrdU对细胞均无毒性影响。结论成功分离、培养了实验性牙移动大鼠外周血EPCs;终浓度为10 μmol/L的BrdU标记EPCs72 h后可获得较高标记率。本实验可为研究EPCs的趋化、分化机制奠定基础。