徐波 张松涛 李龙江 韩波 赵洪伟 潘剑
XU Bo, ZHANG Song-tao, LI Long-jiang, HAN Bo, ZHAO Hong-wei, PAN Jian
摘要:
目的确定重组腺病毒p53(rAd-p53)对口腔黏膜异常增生角化细胞POE-9n转染的最佳滴度及其转染效率,为其在口腔癌前病变领域的进一步研究提供实验依据。方法采用携带绿色荧光蛋白(GFP)报告分子的重组腺病毒颗粒rAd-GFP确定口腔异常增生细胞对腺病毒转染的敏感性;以不同滴度的rAd-p53转染口腔异常增生细胞并通过MTT比色检测各组细胞的增殖抑制率;免疫细胞化学染色证实,rAd-p53转入细胞内表达P53蛋白。结果rAd-GFP转染POE-9n细胞在100~500的感染倍数(MOI)范围内转染效率都大于95%, 当MOI为100、200和500时,转染效率升高不明显(r=0.124,P>0.05);在100~500的MOI范围内rAd-p53对POE-9n细胞增殖的抑制效果显著,MOI=100、MOI=200及MOI=500组的生长抑制率在96 h和120 h时间点差异无统计学意义(P>0.05);rAd-p53转染后的POE-9n细胞中均呈现P53蛋白的强阳性表达。结论MOI=100可作为rAd-p53对POE-9n细胞转染的理想滴度,能获得较高且稳定的转染效率。