华西口腔医学杂志

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人骨形态发生蛋白-2基因克隆及真核表达载体的构建

周诺 黄旋平 廖妮 韦山良 梁飞新 麦华明   

  1. 广西医科大学附属口腔医院口腔颌面外科, 广西南宁530021
  • 收稿日期:2007-10-25 修回日期:2007-10-25 出版日期:2007-10-20 发布日期:2007-10-20
  • 通讯作者: 周诺,Tel:0771- 5358645
  • 作者简介:周诺(1960-),男,广西人,教授,博士
  • 基金资助:

    国家自然科学基金资助项目(30160088);广西壮族自治区自然科学基金资助项目(桂科基0448058)

Cloning of human bone morphogenetic protein - 2 gene and the construction of its eukaryotic expr ession vector

ZHOU Nuo, HUANG Xuan- ping, LIAO Ni, WEI Shan- liang, LIANG Fei - xin, MAI Hua- ming   

  1. Dept. of Oral and Maxillofacial Surgery, Hospital of Stomatology, Guangxi Medical University, Nanning 530021, China
  • Received:2007-10-25 Revised:2007-10-25 Online:2007-10-20 Published:2007-10-20
  • Contact: ZHOU Nuo,Tel:0771- 5358645

摘要:

目的克隆人骨形态发生蛋白- 2(hBMP2)基因片段,构建pcDNA3.1- hBMP2真核表达质粒。方法采用逆转录聚合酶链式反应(RT- PCR)技术,从人骨肉瘤中扩增出人骨形态发生蛋白- 2基因片段,通过DNA重组技术将该基因片段重组于pcDNA3.1真核表达载体上,构建pcDNA3.1- hBMP2重组质粒,通过用PCR扩增、酶切电泳分析及DNA测序的方法对重组DNA进行鉴定。结果经PCR扩增、酶切电泳分析和DNA测序证实,本实验构建的重组质粒目的基因片段为人BMP2- cDNA。结论本实验成功克隆了hBMP2基因并构建成其真核表达质粒。

关键词: 骨形态发生蛋白- 2, 基因克隆, 真核表达载体

Abstract:

目的克隆人骨形态发生蛋白- 2(hBMP2)基因片段,构建pcDNA3.1- hBMP2真核表达质粒。方法采用逆转录聚合酶链式反应(RT- PCR)技术,从人骨肉瘤中扩增出人骨形态发生蛋白- 2基因片段,通过DNA重组技术将该基因片段重组于pcDNA3.1真核表达载体上,构建pcDNA3.1- hBMP2重组质粒,通过用PCR扩增、酶切电泳分析及DNA测序的方法对重组DNA进行鉴定。结果经PCR扩增、酶切电泳分析和DNA测序证实,本实验构建的重组质粒目的基因片段为人BMP2- cDNA。结论本实验成功克隆了hBMP2基因并构建成其真核表达质粒。

Key words: 骨形态发生蛋白- 2, 基因克隆, 真核表达载体