高振南,高家让,田卫东,李声伟,刘磊,付春华
GAO Zhen- nan, GAO Jia-rang, TIAN Wei-dong, LI Sheng-wei, LIULei, FU Chun-hua
摘要： 目的 应用人肿瘤坏死因子-α(hTNF-α)基因转染人胚成肌细胞,观察转染hTNF-α基因后人胚成肌细胞表 达和分泌hTNF-α的水平。方法 用阳离子脂质体DOSPER介导含hTNF-α基因的穿梭质粒pSV23SHTNF转染人胚 成肌细胞;对照组只给予等量的脂质体,不加入质粒。转染基因后24、48、72、96 h用免疫组织化学染色观察hTNF-α 基因在人胚成肌细胞细胞浆和细胞膜的表达水平,并用ELISA法检测人胚成肌细胞培养上清液中hTNF-α的浓度。 结果 免疫组织化学染色发现实验组人胚成肌细胞在转染hTNF-α基因后24、48、72、96 h均见细胞浆和细胞膜hT- NF-α呈强阳性表达,而对照组均呈弱阳性;ELISA检测发现实验组人胚成肌细胞培养上清液中hTNF-α平均浓度在 各时期均高于对照组(P<0.05),尤以转染72 h后最高,达401.0 pg/ml。结论 hTNF-α基因转染成肌细胞,可使成 肌细胞持续高表达和高浓度分泌hTNF-α,提示可以用hTNF-α基因转染舌癌周围肌细胞,使癌周微环境肌细胞持续 表达和分泌高浓度hTNF-α来抑制舌癌向肌深层浸润。
