傅春华1,田 聆2,魏于全2,文艳君2,李 炯2
FUChun-hua1,TIAN Ling2,WEI Yu-quan2,WEN Yan-jun2,LI Jong2
摘要:
目的 克隆BALB/c小鼠可溶性B淋巴细胞刺激因子(msBlyS)的cDNA片段并测序分析,为研究msBlyS诱导的抗肿瘤作用提供目的基因。方法 采用反转录聚合酶联反应(RT-PCR)法从BAL B/c小鼠脾脏组织总RNA中获得566 bp的msBlyS基因cDNA。通过TA克隆测序无误,再将其定向连接到pSecTag2B真核表达载体上,转化 E.coliXL1-blue。限制性内切酶筛选出阳性克隆pSecTag2B-msBlyS,末端终止法完成msBlyS cDNA的序列测定。结果 测得的msBlyS cDNA序列与基因文库中报道序列完全相同,插入相位正确,未改变目的基因的阅读框架。结论 成功克隆了小鼠可溶性B淋巴细胞刺激因子基因,为研究其诱导的抗肿瘤作用奠定了基础。