目的:研究nm23-h1对腺样囊性癌细胞株(adnoid cystic carcinoma cell line-M,ACC-M)的肺转移是否具有抑制作用。方法:20只裸鼠,随机分为两组,实验组每只裸鼠经尾静脉注入5×106个用阳离子脂质体介导nm23-h1质粒体外转染所得阳性表达的ACC-M细胞,对照组注入等量的未转染ACC-M细胞,1周及4周时处死动物获取肺标本,常规组织学观察。结果:1周时实验组未见转移,而对照组有少量小转移灶;4周时实验组肺内仍未见转移灶,对照组可见大量灰白色转移结节。结论:nm23-h1对ACC-M的肺转移具有抑制作用。

目的:观察骨形成蛋白(bone morphogenetic protein)特异的细胞内信号转导分子Smadl在人牙乳头细胞内的表达及信号转位过程,从细胞内信号转导水平探讨牙齿发育过程中成牙本质细胞的分化机制。方法:原代培养人牙乳头细胞,用转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)和重组人骨形成蛋白骨形成蛋白2(recombinant hu-man bone morphogenetic protein,rhBMP2)刺激培养的细胞,对照组用0.2％FCS的DMEM的培养液培养,不加任何刺激。免疫组化观察。结果: TGF-β1和rhBMP2刺激组均可见Smadl蛋白表达,但与对照组相比无明显差异;rhBMP2组可见Smadl从胞浆转位至核内聚集,TGF-β1组未见此作用。结论:首次观察到Smadl基因在人牙乳头细胞内的表达并参与信号转位过程,提示BMP2在牙乳头细胞内信号传递可能是通过Smadl转位至核内引起基因表达实现的。

目的:探讨纯钛铸件的化学抛光效果。方法:3组板状铸件(15mm×15 mm×1.4 mm)分别给予以下3种处理:A组铸件喷砂后不做其它处理;B组铸件喷砂后常规手工研磨;C组铸件喷砂后化学抛光。测试B、C两组铸件的减重率(-wt％),各处理组铸件的表面粗糙度(Ra值)和表面氧化膜厚度。结果:肉眼观察经化学抛光的纯钛铸件表面呈镜面状。化学抛光组的减重率高于手工研磨组,Ra值小于手工研磨组(P<0.05)。其表面存在约8μm厚的氧化膜,且均匀一致。结论:纯钛铸件化学抛光效果良好,具有临床推广价值。

目的:制备615小鼠MHCⅠ目的基因(H-2Kk)载体,获得高表达MHCⅠ分子功能的单克隆细胞株。方法:将615小鼠MHCⅠ(H-2Kk)cDNA定向连接至PLXSN逆转录病毒质粒,转染E.coli JM109,限制性酶切分析法筛选出重组质粒PLXSN-H-2Kk,继而转染PA317细胞,经G418筛选获得抗性PA317单克隆细胞株,并转染NIH3T3细胞,依抗性NIH3T3细胞克隆数目,鉴定病毒液的滴度和PA317单克隆细胞株。结果:转染成功的病毒液滴度位于1.6×104～1.1×105 CFU/ml之间,PA317单克隆细胞株成片生长良好,并高表达H-2Kk产物。结论:H-2Kk cDNA重组逆转录病毒质粒的成功构建、包装和滴度鉴定为在615小鼠上进行恶性肿瘤的MHC Ⅰ转基因治疗奠定了物质基础。

目的:探讨关节盘前移后双板区的适应性改建。方法:日本大白兔30只,先制作成关节盘前移位动物模型,定期处死,取关节标本作HE染色、阿尔辛蓝、间苯二酚-品红染色、细胞凋亡检查和蛋白多糖含量测量。结果:在关节盘移位的初期,双板区即发生细胞凋亡,胶原纤维和弹力纤维排列紊乱、断裂;蛋白多糖先是急剧下降,然后缓慢上升。4周后,双板区内可出现软骨样细胞或典型的软骨组织。结论:双板区在关节盘移位后会进行重构,使之成为类似纤维软骨样组织。

目的:研究硫酸软骨素A(chondroitin sulfate-A,CS-A)对成骨细胞生长发育及矿化的影响。方法:将人胚成骨细胞放入含有不同浓度的CS-A的DEMA培养液中培养,检测成骨细胞的增殖情况、碱性磷酸酶活性及细胞层钙含量。结果:低浓度(1 mg/ml和0.5 mg/ml)CS-A能促进成骨细胞的增殖,高浓度(10 mg/ml)CS-A对成骨细胞增殖有轻度抑制作用。培养基中游离的CS-A能减少细胞层中的钙含量,高浓度时显著地抑制了钙在细胞层的聚集;CS-A对成骨细胞碱性磷酸酶的活性无抑制作用。结论:CS-A对成骨细胞的生长增殖有一定的影响,CS-A在体内可调节成骨细胞矿化,但不影响成骨细胞的分化。

目的:探讨舌癌化疗的作用机制。方法:60例患者的术后石蜡标本分为3组,其中舌癌化疗组10例,舌癌组30例,舌乳头状瘤组20例。采用原位末端标记法和免疫组织化学染色,并检测舌癌化疗后的细胞增殖、细胞凋亡及Bcl-2表达。结果:舌癌组细胞增殖指数(PI)显著高于乳头状瘤组(P<0.05),而细胞凋亡指数(AI)低于乳头状瘤组(P<0.05);舌癌化疗组与舌癌组比较,AI显著升高(P<0.05),PI显著降低(P<0.05);舌癌化疗组与舌癌组比较,Bcl-2阳性细胞指数明显降低(P<0.05);舌癌化疗组中PI与AI呈负相关(r=-0.739),Bcl-2阳性细胞指数与AI呈负相关(r=-0.787)。结论:化疗药物抑制肿瘤生长的机制可能与抑制肿瘤细胞增殖和诱导肿瘤细胞凋亡有关,这种作用可能是通过下调Bcl-2表达水平实现的,提示舌癌术前化疗对肿瘤的预后有重要意义。

目的:探讨种植体即刻负荷后(牙合)重建对种植体周骨质变化的影响。方法:26枚骨内种植体植入8例患者口内,13枚为即刻负荷,13枚为延期负荷。采用数码X线片仪测定种植体周骨密度变化并作相关临床指征分析。结果:即刻负荷种植体周骨质密度的改善较延期负荷者明显。,结论:种植即刻修复中的(牙合)稳定和平衡是即刻负荷种植体形成骨整合界面的保证。

目的:评价替硝唑棒对牙周炎和冠周炎病原菌的抗菌作用。方法:(1)采用厌氧菌药物敏感试验的二倍琼脂稀释法测定替硝唑和甲硝唑对200株临床分离株的MIC50和MIC90。(2)采用厌氧菌培养方法测定51例牙周炎和冠周炎患者局部应用替硝唑和甲硝唑前后,牙周炎病原菌和冠周炎病原菌的变化。结果:替硝唑棒剂对牙龈卟啉单胞菌、中间普氏菌、梭杆菌和消化链球菌具有明显抗菌作用,其MIC50和MIC90分别为0.25、0.25、0.25、8 mg/L和0.5、0.5、1、8mg/L;其清除率为94.4％～100％,细菌数量均有明显减少。替硝唑对牙周炎和冠周炎病原菌的抗菌活性明显强于甲硝唑(P<0.05)。结论:局部应用替硝唑棒可明显抑制牙周炎和冠周炎的病原菌。

目的:探讨采用头颈部游离组织瓣移植行头颈部重建的效果。方法:对1999年5月～2000年10月采用游离组织瓣移植行头预部重建的144例患者作回顾性研究,分析采用组织瓣的类型、受区血管、血管吻合方式和技术、组织瓣成活情况及术后并发症的发生情况。结果:前臂皮瓣、腓骨瓣和腹直肌瓣为最常用的行头颈部重建的游离组织瓣,占全部皮瓣的94.7％;游离组织瓣移植的成功率为98％,术后血栓的发生率为6％,抢救成功率为66.7％;受区和供区总的并发症发生率为34％,但大多数并发症均不严重,没有造成明显的后果;吸烟、饮酒、放疗和患者年龄等均非影响游离组织瓣移植成功的重要因素。结论:头颈部游离组织瓣移植安全可靠,且优于传统的带蒂组织瓣移植,是头颈部重建的合理选择。

目的:总结婴儿期外科治疗腭裂的经验。方法:回顾近6年531例2～12月各型腭裂患儿的临床资料,对手术时间、术中出血及并发症等进行分析。结果:手术时间、手术失血量与裂隙程度有关(均F<0.05);与传统大于周岁行腭裂手术的患儿相比,婴儿期手术失血少,而术后出血发生率、手术时间、死亡率两者无差别;婴儿期手术也不会增加术后瘘孔发生率,但术后呼吸道梗阻率略高。结论:掌握好适应证及电外科技术,婴儿期腭裂手术是一种安全、疗效好的治疗方法。

目的:探讨用脉冲Nd:YAG激光脱敏的形态学依据。方法:选择离体上下颌第二恒磨牙,用单面金刚砂片垂直于牙长轴在(牙合)面牙尖下1.0 mm和2.5mm处切断,制成1.5 mm厚的牙片4张。用相同能量(1 w、10 Hz、100 mJ)激光分别以5 s、10 s、15 s和20 s照射4张牙片,在照射区形成4种不同的激光能量密度。牙片自然干燥后喷金,扫描电镜观察牙本质形态变化。结果:4种激光能量密度照射均可在牙本质小管口形成堵塞。随能量密度增加,牙本质熔融程度、深度和均质化增加,但在激光集中照射区域,有牙本质微裂及凹坑出现。结论:41.6 J/cm2的激光能量密度既可完善封闭牙本质小管,又不会导致微裂和凹坑结构发生,可作为激光脱敏的参考阈值。

目的:检测真菌在感染根管中的阳性率,探讨真菌与患牙临床症状及体征间的关系。方法:将患急性根尖脓肿、慢性根尖周炎、牙髓坏死、坏疽和慢性牙髓炎的患牙109颗,取根髓标本涂片,固定后过碘酸雪夫氏染色法(PAS)染色。记录临床资料及患牙的PAS染色结果并作统计学分析。结果:109颗患牙中PAS阳性率28.44％,露髓与未露髓牙间PAS阳性率差异有显著性;PAS染色结果与临床症状、体征无明显关系。结论:因龋齿和楔状缺损导致露髓或近髓患牙的根管中存在真菌的可能性较大。

目的:探讨变形链球菌葡糖基转移酶遗传多态性与龋病发生的关系。方法:菌株分别选自本实验室前期工作中分离鉴定的合成水不溶性多糖能力较强和较弱的血清c型变形链球菌临床分离株，提取全菌DNA，经PCR扩增gtfBC(961 - 5574 by)后，分别采用限制性内切酶Hinf工、Mb。工和Taq工进行限制性片段长度多态性分析。结果: 不同龋敏感人群变形链球菌血清。型临床分离株经Hinf工酶切后限制性片段长度多态性分析酶谱出现了差异，有 1.9 kb长片段的菌株在高龋组中的比例高于无龋组(P < 0.05)。结论:萝基因型的不同是导致菌株合成水不溶性多糖能力差异的原因之一。

目的:探讨变形链球菌表面蛋白A区遗传多态性与其粘附性能的关系。方法:分别选取本实验室前期工作所获得的粘附能力较强和较弱的血清c型变形链球菌临床分离株，提取全菌DNA，经PCR扩增表面蛋白A区编码基因spaP-a后，用限制性内切酶Hae班进行限制性片段长度多态性分析。结果:经Hae ]II酶切后，两组血清c型变形链球菌均出现了4种基因型，且4种基因型在两组菌株的构成情况不同。结论:血清c型变形链球菌临床分离的 spaP-a具有遗传多态性，粘附能力较强的菌株比粘附能力较弱的菌株具有更明显的异质性。

目的:研究A系小鼠胚愕突上皮与间充质细胞在DMEM/F-12培养基中进行原代和传代联合培养及其生物学特性。方法:采用机械分离及胰蛋白酶消化法，简便、准确、快速地获得高成活率的A系小鼠胚愕突细胞，并通过流式细胞仪、相差显微镜、光镜等观察其DNA及蛋白质合成、细胞骨架及其结构。结果:联合培养的A系小鼠胚鳄突细胞中，愕突上皮及间充质细胞均能较好地生长，光镜下观察见上皮型细胞呈多角型，单层铺路石状排列，细胞骨架为栅栏型或巢穴型;间充质细胞呈梭型，单层漩涡状排列，细胞骨架呈梭型、多平行排列的纤维。流式细胞仪检测见细胞DNA及蛋白质含量较丰富，细胞增殖活跃。结论:A系小鼠胚愕突上皮与间充质细胞联合培养模型能较好地保持体内胚愕突的上皮细胞及间充质细胞细胞成分的基本特征。

目的:探讨破骨细胞分化因子(ODF)和巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)联合应用进行体外诱导小鼠骨髓细胞形成破骨细胞(OC)的能力。方法:收集5～6周小鼠骨髓细胞,在含M-CSF(10 ng/ml)的α-MEM全培养液中培养24h,然后将悬浮生长的细胞接种到24孔培养板,并加入不同浓度的ODF和M-CSF。,通过观察抗酒石酸盐酸性磷酸酶(TRAP)染色的阳性细胞和能否在骨磨片上形成吸收陷窝来鉴定OC形成情况。结果:在只加入ODF或M-CSF一种细胞因子时,未见有TRAP阳性或CTR阳性细胞形成,同时加入ODF和M-CSF,可形成典型的OC。TRAP阳性多核细胞的数目和培养液中钙离子浓度的增加与ODF的浓度呈正相关。结论:小鼠骨髓来源的单核细胞在ODF和M-CSF共同作用下可形成具有骨吸收功能的OC,为体外研究OC的分化发育和功能调节提供了一种新的方法。

目的:初步探讨偏侧咀嚼致颞下颌关节病的致病机理。方法:间断磨除大鼠单侧上下颌磨牙至龈缘,建立生长发育期大鼠偏侧咀嚼模型,采用免疫组织化学方法检测正常对照组及实验组大鼠髁突软骨热休克蛋白70(HSP70)的表达。结果:正常组大鼠髁突软骨各带(表面带、增殖带、肥大带、钙化软骨带)均存在HSP70基础表达;实验组大鼠咀嚼侧髁突软骨细胞HSP70表达增强,而非咀嚼侧髁突软骨细胞HSP70表达无明显改变。结论:偏侧咀嚼可使生长发育期大鼠髁突软骨细胞HSP70表达增强,其致病机理仍有待进一步研究。