目的　探讨骨骼肌失神经的退变和再生。方法　以纯系BALB/C小白鼠为实验动物,切断一侧坐骨神经, 术后1,2,4,8,12,16周分别处死动物,取腓肠肌分别进行光电镜观察和免疫组化研究。结果　骨骼肌失神经早期主要为肌纤维萎缩,随后退变和再生,较长时间失神经后再生的肌细胞再发生退变。失神经后1~4周肌动蛋白和肌红蛋白表达均降低,8周出现较小的细胞阳性染色,肌纤维阳性染色主要位于核周,12~16周大片的细胞核周有较浅的阳性胞浆染色。这些细胞不具正常肌纤维形态。结论　骨骼肌失神经后退变和再生同时存在,由于无神经支配,再生的肌细胞不能分化发育为成熟的肌纤维,而再发生退变;较长时间失神经后再生的成肌细胞相互融合呈片状分布,未能发育为成熟的肌纤维。

目的　采用体外微核法评价新型纳米根管充填材料nHA-PA66的基因毒性。方法　以V79细胞作为实验细胞,采用新型纳米根管充填材料nHA-PA66粉剂及混合物的浸提液作为实验组,丝裂霉素C为阳性对照组,用 MTT法检测各组的细胞毒性,以V79细胞中所形成的微核数作为标准评价材料的基因毒性。结果　实验组的MTT 值在各个时间段与阴性对照组无显著性差异(P>0·05);所形成的微核数(粉剂组:6·1±1·1/1 000;混合物组:5·7± 0·6/1 000)与阴性对照组(5·3±0·8/1 000)无显著性差异(P>0·05),而与阳性对照组(123·9±8/1 000)有显著性差异 (P<0·05)。结论　本实验显示新型纳米根管充填材料nHA-PA66无细胞毒性及基因毒性,生物相容性好。

目的　建立转人内皮抑素(hES)基因舌鳞癌Tca8113细胞,检测体外培养的转基因细胞基因蛋白表达。方法　为了建立携带hES基因的舌鳞癌Tca8113细胞克隆,选用阳离子脂质体Lipofectamin为载体,将含hES基因的质粒———pBLAST-hES转染Tca8113细胞,以Blasticidin S抗生素筛选阳性克隆。免疫组织化学S-P方法检测体外培养的转基因Tca8113细胞克隆中ES的表达。结果　经Blasticidin S抗生素筛选,转染hES基因的Tca8113细胞由于具有 bsr抗性基因,可以在含有50μg/ml Blasticidin S的培养基中生长和传代,从而得到携带hES基因的Tca8113细胞克隆。该细胞在体外培养传代96 h后,经免疫组织化学检测,hES表达的强阳性(+++)率为100%。结论　以脂质体介导hES基因转染Tca8113细胞效率高,转基因细胞具有高效表达活性目的基因产物的能力。

目的　探讨颞下颌关节盘前移位后髁突软骨细胞基质基因表达的变化。方法　建立40只大白兔颞下颌关节盘前移位动物模型,用地高辛标记cRNA探针原位杂交技术,检测术后不同病变时期髁突软骨细胞Ⅱ型胶原和蛋白多糖聚合体基因表达的改变。结果　正常髁突的增殖层深层、肥大层和钙化层细胞胞浆内可见大量Ⅱ型胶原和蛋白多糖聚合体mRNA表达。术后1周蛋白多糖聚合体开始下调,至2周达低谷,6周后恢复至正常水平。Ⅱ型胶原4周后开始持续下降,其表达下降程度较蛋白多糖聚合体显著,8周后逐渐恢复正常。结论　关节盘前移位后髁突软骨的基质基因表达发生有序、协调的变化,这种变化意味着适应性改建的启动。

目的　通过分析口腔鳞癌中浸润性树突状细胞的特征性表型,以探讨其在肿瘤微环境中的功能状态。方法　选择未经任何非手术治疗的初发口腔鳞癌患者标本34例作为实验组,30例口腔正常粘膜组织作为对照组。通过免疫组化技术标记组织中树突状细胞(DC)的CD1a,HLA-DR和CD83抗原,观察两种组织中的DC表达3种抗原的状况,结果进行统计学分析。结果　所有病例均未见明显CD83+DC,但均有CD1a+DC,其在口腔鳞癌组织中的浸润程度低于正常口腔粘膜组织,差异有显著性(P<0·05)。在口腔鳞癌组中有27例癌实质内的DC表达HLA- DR抗原,其HLA-DR的阳性表达率为79·41%。结论　口腔鳞癌组织中的DC,其浸润程度下降并存在功能成熟障碍。

目的　探讨基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在口腔粘膜鳞状细胞癌中的表达特点及其与颈淋巴结转移的关系。方法　应用免疫组织化学LsAB法观察MMP-2在口腔癌生长前沿区与中央区细胞中的表达分布特点,并分别与颈淋巴结转移发生进行统计学分析。结果　71例口腔癌原发灶均有MMP-2表达,在口腔癌生长前沿区细胞的表达明显强于中央区(P<0·01),呈条带状分布;口腔癌前沿区细胞MMP-2表达强度与颈淋巴结转移的发生呈正相关(P<0·05),而中央区MMP-2表达强度与颈淋巴结转移无关(P>0·05)。结论　口腔癌生长前沿区细胞MMP-2 表达明显强于中央区,与颈淋巴结转移有关,可作为口腔癌颈淋巴结转移的预测指标。

目的　考察nm23-h1导入腺样囊性癌细胞(ACC-M)后对其体内、外增殖的影响。方法　以阳离子脂质体 (lipofectamine)介导nm23-h1转染ACC-M细胞,体外培养并用G418培养基筛选,体外观察转染组生长情况,并用细胞爬片免疫组化ABC法染色Ki67单克隆抗体;将nm23-h1阳性表达的ACC-M植入10只裸鼠皮下,同时以未转染的 ACC-M作对照,观察肿瘤大小。4周后处死动物,获取标本,常规固定、包埋、切片后采用免疫组化LsAB法研究Ki67 的表达并用流式细胞仪对转染组和非转染组的移植瘤进行细胞周期时相分析。结果　体外培养转染组细胞生长较未转染组慢,这种趋势随着转染组传代次数的增加而更加明显,Ki67呈阳性表达,未转染组Ki67呈部分阳性表达;转染组ACC-M体内移植瘤早期(2周)生长缓慢,2周后生长无统计学差异(P>0.05),细胞周期时相分析结果与之一致。组织切片显示瘤体Ki67,nm23-h1表达均为阴性。结论　nm23-h1的导入可能对ACC-M细胞增殖具有短时间的抑制作用。

目的　探讨硫代反义Bcl-xL寡脱氧核苷酸(AS-sODN)对BcaCD885颊癌细胞凋亡及热敏感性的影响。方法　以脂质体Lipofectin为载体,转染AS-sODN于BcaCD885细胞内,倒置显微镜观察细胞形态学改变,TUNEL原位末端标记检测细胞凋亡,流式细胞技术(FCM)测定细胞凋亡率及Bcl-xL蛋白表达水平;转染AS-sODN于BcaCD885 细胞内,再以43℃,40 min加热细胞,FCM检测细胞凋亡率。结果　AS-sODN转染后,BcaCD885颊癌细胞出现皱缩、呈浮起状,TUNEL原位末端标记阳性,Bcl-xL蛋白表达明显下降(P<0·05),热诱导细胞凋亡率明显提高(P< 0·05)。结论　硫代反义Bcl-xL寡脱氧核苷酸能诱导BcaCD885颊癌细胞凋亡并能提高其热敏感性。

目的　探讨唾液腺粘液表皮样癌耐药性产生的机制,以便有针对性地采取逆转措施提高综合治疗中化疗的效果。方法　选取四川大学华西口腔医院口腔颌面外科1995~2000年40例术前未经任何治疗的唾液腺粘液表皮样癌标本,采用免疫组化ABC法,进行P-gp单克隆抗体JSB-1的检测,同时对其中10例进行了GST-π的检测。结果　JSB-1表达阳性率为67·5%(27/40),与分化程度相关,高分化组和中分化组均高于低分化组(P<0·05),高分化组和中分化组之间无统计学差异(P>0·05)。GST-π表达阳性率为90%(9/10)。两种抗体的表达在唾液腺粘液表皮样癌组织中的表达无统计学差异,亦无相关性。结论　JSB-1及GST-π与唾液腺粘液表皮样癌产生耐药的机制有关,为开展其耐药性的研究提供了靶标。

目的　评价带血管蒂小腿外侧皮瓣游离移植修复口腔颌面软组织缺损的临床应用价值。方法　1999年 11月~2002年12月对21例口腔颌面部肿瘤患者应用小腿外侧皮瓣游离移植修复其术后软组织缺损。手术采用血管吻合。其中7例为携带肌肉的肌皮瓣移植。采用游离小腿外侧皮瓣,最大12 cm×8 cm,最小5·0 cm×3·5 cm。结果　术后皮瓣20例成活,1例皮瓣坏死,皮瓣成活率为95·24%。术后19例颌面部外形恢复及张闭口语音功能达到满意或较为满意,1例因皮瓣面积不足,外形恢复欠佳。结论　带血管蒂的游离小腿外侧皮瓣具有血管蒂长、管径粗、组织量大、成活率高、供区隐蔽等优点,是口腔颌面部软组织缺损修复重建的最佳方法之一。

目的　探讨原发性鳃裂癌临床特点及预后。方法　对5例原发性鳃裂癌的临床特点、诊断、鉴别诊断、治疗及预后进行回顾性分析。结果　5例原发性鳃裂癌行肿物扩大切除及根治性颈淋巴结清扫术,术后放射治疗。其中3例有区域性淋巴结转移:1例取出15个淋巴结者有13个有转移,1例取出8个淋巴结者有4个转移。2例在术后8个月和1年内因肿瘤局部复发及远处(肺)转移死亡,1例在术后2年内死亡。2例随访5年,健在。结论　术前与鳃裂囊肿的临床特点极为相似。对颈上部无痛性肿物且有区域性淋巴结肿大者应考虑本病。常规术中快速冰冻切片确诊。肿物扩大切除加根治性颈部淋巴结清扫术可提高治愈率及生存率。

目的　评价倒敞法预备中等弯曲度根管(弯曲度为30°~60°)的效果。方法　选择2001年11月~2003 年8月在四川大学华西口腔医院牙体牙髓科因牙髓炎或根尖周炎就诊,需作根管治疗患者的48颗下颌第一磨牙为研究对象。患牙近中根弯曲度按Schineider法计算为30°~60°。其中实验组27颗患牙采用倒敞法预备根管,对照组21颗患牙采用逐步后退法预备根管。比较两组预备方法在根管预备中及预备后达到根管工作长度的例数。结果　①实验组初尖锉测量达到根管工作长度的例数显著高于对照组(χ2=4·704,P<0·05),②实验组主尖试充测量达到根管工作长度的例数也显著高于对照组(χ2=7·759,P<0·05)。结论　在中等弯曲根管预备中,倒敞法优于逐步后退法,值得在临床推广应用。

目的　观察婴儿口腔早期定植细菌的动态变化。方法　收集12例健康新生儿出生后第1天和1、3、6、9、 12个月的口腔样本,选择适当稀释度接种于BA、MSA、BHI培养基,经需氧、微需氧及厌氧条件培养后行细菌形态学及生化鉴定。结果　婴儿口腔中检出率最高的细菌为S.salivarius,其次为S.mitis;乳牙萌出后S.sanguis,S.gordo- nii和S.mutans有一定的检出;Veillonella spp.在出生后1月的新生儿口腔即有一定的检出,A.odontolyticus在3个月时开始有8.3%的检出;L.acidophilus在婴儿口腔一直维持在较低的检出水平;少数有部分乳牙萌出的婴儿口腔中检出L.buccalis与Capnocytophaga spp.的存在。结论　S.salivarius与S.mitis是新生儿及婴儿口腔的优势细菌,Veil- lonella是最早、最常检出的厌氧菌,A.odontolyticus是最早检出的放线菌,随着婴儿月龄的增加,其口腔中检出细菌的种类和数量均明显增加。

目的　探讨口腔颌面部横纹肌肉瘤的诊疗方法。方法　选择1981~2001年在四川大学华西口腔医院颌面外科治疗的横纹肌肉瘤患者共74例,按WHO(1972)的横纹肌肉瘤TNM分期和国际横纹肌肉瘤协作组(1988)对该瘤的临床分期进行分期,探讨横纹肌肉瘤病理分型,临床分期及治疗方法与预后的关系。结果　74例患者中,有 34例行扩大切除术,18例行局部切除术,术后所有患者均接受了不同剂量的放疗,另有22例患者因病变范围广或是儿童而只接受了放疗或者放、化疗联合治疗。随访病例的5年生存率随病期和治疗方案的不同而有显著差异, 肿瘤复发和手术切除边缘及临床分期明显相关。结论　采用扩大切除术加术后放疗对提高本病的治愈率,减少复发有明显效果;晚期或儿童患者采用局部切除联合放、化疗对于提高5年生存率有良好效果。

目的　探讨使用可吸收医用膜修复硬腭裂隙的可行性及评价其近期临床效果。方法　68例腭裂患者随机分为实验组和对照组。实验组34例患者在软腭及悬雍垂裂修复的同时剖开硬腭裂隙,植入可吸收医用膜修复; 对照组34例采用常规腭裂修复术。结果　实验组所有患者其软腭及悬雍垂创口愈合良好,无穿孔与裂开;硬腭部创口一期愈合30例,二期愈合3例,1例遗留永久性的口鼻瘘,3例存在口腔前庭瘘。与对照组相比较,其出血量及口腔前庭瘘发生率减少,手术时间无明显延长,术后出血、呼吸困难等并发症无明显增加;术后体温多波动在 37·5℃以下,且逐渐降低,7 d后复查血常规与对照组相比无显著异常。结论　可吸收医用膜用于硬腭裂隙修复, 临床效果肯定且手术操作简单、可行,同时因避免了常规腭裂修复术时在硬腭部掀起粘骨膜瓣的缺点,可减少对颌骨发育的影响。

目的　比较透明质酸钠颞下颌关节上腔注射和上下腔注射对颞下颌关节紊乱病的疗效。方法　纳入294 例颞下颌关节紊乱病患者,随机分为两组。一组186例采用颞下颌关节上腔注射透明质酸钠,另一组108例采用上下腔注射。用回顾性队列研究方法比较两组疗效的差异。结果　上下腔注射组患者开口度平均增加6·29 mm,上腔注射组平均增加3·82 mm,两组间有显著差异(P=0·001)。上下腔注射组患者关节疼痛平均缓解44%,关节上腔注射组平均缓解37%,两组间有显著差异(P=0·039)。结论　透明质酸钠注射对颞下颌关节紊乱病确有疗效,其中关节上下腔同时注射较单纯上腔注射可更有效缓解患者的关节疼痛和改善张口度,该趋势在骨关节炎和关节盘不可复性前移位患者更为明显。

目的　了解成都地区正常人群临床牙冠中心高度的分布规律并结合曲线的规律对全程式化预成序列托槽的粘接高度进行探讨。方法　符合纳入标准的未接受过正畸治疗的成都地区18~35岁正常者75例为研究对象。其中男性36例,女性39例。测量样本临床牙冠中心高度,分析正常人群的临床牙冠中心高度的分布规律;测量下颌临床牙冠中心点连线和Spee曲线的曲度并通过相关分析检测二者的相关性。结果　①成都地区正常人群临床牙冠中心高度呈正态分布且标准差较小(<0.5 mm);②不同性别间各同名牙临床牙冠中心高度测量值无统计学差异(P<0.05);③下颌临床牙冠中心点连线与Spee曲线的曲度具有高度相关性(γ=0.986, P<0.000 1)。结论　①成都地区正常人群各同名牙临床牙冠中心高度的差异较小;②男女间各同名牙临床牙冠中心高度无显著性差异;③提供了一套适合成都地区人群的全程式化预成序列托槽矫治器临床粘接高度参考值; ④一般情况下,应该按照临床牙冠中心点的高度粘接全程式化预成序列托槽。在一些特殊情况下,应该对托槽粘接高度进行适当的调整。

目的　克隆BALB/c小鼠可溶性B淋巴细胞刺激因子(msBlyS)的cDNA片段并测序分析,为研究msBlyS诱导的抗肿瘤作用提供目的基因。方法　采用反转录聚合酶联反应(RT-PCR)法从BAL B/c小鼠脾脏组织总RNA中获得566 bp的msBlyS基因cDNA。通过TA克隆测序无误,再将其定向连接到pSecTag2B真核表达载体上,转化 E.coliXL1-blue。限制性内切酶筛选出阳性克隆pSecTag2B-msBlyS,末端终止法完成msBlyS cDNA的序列测定。结果　测得的msBlyS cDNA序列与基因文库中报道序列完全相同,插入相位正确,未改变目的基因的阅读框架。结论　成功克隆了小鼠可溶性B淋巴细胞刺激因子基因,为研究其诱导的抗肿瘤作用奠定了基础。

目的　研究血链球菌合成的生态调节因子———对氨基苯甲酸(PABA)对变形链球菌细胞表面疏水性的影响,从而进一步了解PABA影响细菌粘附的机制。方法　在不同PABA浓度(10-9g/L、10-7g/L、10-4g/L)的改良Carls- son液体培养基中厌氧培养变形链球菌,并采用微生物粘着碳氢化合物法测试细胞表面疏水性。结果　低浓度的 PABA可增强变形链球菌细胞表面疏水性,当浓度增加到一定范围则可降低其细胞表面疏水性。结论　PABA可能通过降低细菌非特异性疏水作用而抑制变形链球菌的粘附。

目的　采用不同制作方法制备根管桩并以不同粘接材料粘接于根管内,测量并比较桩固位力的差别,为临床上选择获得桩最大固位力的制作方法和粘接剂提供依据。方法　将完整的人上前牙90颗分为间接法、直接法、预成桩3组,每组设平行3组,分别于釉牙骨质界处水平截断,并机械预备根管,然后包埋在塑料圈内,用万能实验机测量并记录桩脱位时所受的拉力。结果　预成桩和直接桩的固位力明显高于间接桩的固位力(P<0·05),但预成桩与直接桩之间无显著性差异(P>0·05);Parapost cement的固位力明显高于HY-Bond和磷酸锌粘固剂的固位力(P<0·05),但磷酸锌粘固剂与HY-Bond之间无显著性差异(P>0·05)。结论　不同制作方法及不同粘接剂对桩的固位力有显著性影响,且两者之间有相互作用。

目的　探讨p16和nm23基因在唾液腺良、恶性肿瘤中的表达情况及与唾液腺肿瘤发生之间的关系。方法　用免疫组织化学SABC法检测39例正常唾液腺和唾液腺肿瘤存档石蜡标本中P16蛋白和nm23蛋白的表达。结果　P16和nm23蛋白阳性表达主要见于细胞浆及细胞核,呈棕黄色。在正常唾液腺中,二者阳性表达率均为100% (4/4)。在良性和恶性唾液腺肿瘤中,P16蛋白阳性表达率分别为76·9%(10/13)和40·9%(9/22),良恶性之间P16蛋白表达差异有统计学意义(P<0·05);nm23蛋白阳性率分别为84·6%(11/13)和45·5%(10/22),良恶性之间亦有统计学意义(P<0·05)。唾液腺肿瘤中P16与nm23表达之间无相关性。结论　p16和nm23基因在唾液腺肿瘤发生中可能分别起着不同的重要作用,其表达下降可能有利于唾液腺恶性肿瘤的形成。

目的　探讨Fcγ受体ⅡA基因多态性和慢性牙周炎的易感性相关关系。方法　采用序列特异性引物多聚酶链反应(PCR-SSP),对63例重度慢性牙周炎患者、103例轻中度慢性牙周炎患者及80名健康对照者的Fcγ受体 ⅡA基因多态性进行检测,比较各组间基因型分布及等位基因频率的差异。结果　FcγRⅡA-R/R131基因型在重度慢性牙周炎与健康对照组之间的分布差异有显著性(P<0·012 5),而在轻中度慢性牙周炎组与健康对照组、重度慢性牙周炎组与轻中度慢性牙周炎组之间的分布差异无显著性(P>0·012 5)。结论　FcγRⅡA-R/R131基因型与慢性牙周炎的严重程度相关,提示其可能与汉族人群慢性牙周炎的易感性有关。

目的　评价作者自行研制的新型Comfort义齿粘附剂(Comfort-DA)的体外细胞毒性。方法　Comfort-DA置于细胞培养液72 h制备出材料的浸提液,用同一培养液再稀释为50%、75%浓度后分别加入含人口腔成纤维细胞悬浮液的培养板中,其中空白对照组仅加入新鲜培养液。3块培养板分别继续在5% CO2、37℃培养箱内开放培养 2 d、3 d和4 d后,四唑盐比色法观察细胞的活性以研究细胞增殖率,用分光光度计以490 nm波长测光密度值(OD), 组间方差分析并评定该材料的毒性级。结果　空白对照组、Comfort-DA的50%和75%浓度组间OD值的差别有显著性意义(P<0·05);各组浓度Comfort-DA的毒性程度为“0~2”级。结论　作者所研制的新型Comfort-DA仅有较轻微的细胞毒性。